Гистологический препарат кожа с волосом


33. Кожа с волосом — МГМСУ им. А.И. Евдокимова

33. Кожа с волосом

Гистологический препарат №33
Кожа с волосом.

Окраска гематоксилином и эозином. Малое и большое увеличение.
Обратить внимание на меньшую толщину эпидермиса и рогового слоя, отсутствие блестящего слоя, а также не-выраженность сосочкового слоя дермы и хорошее развитие сетчатого слоя дермы по сравнению с кожей пальца (толстая кожа). Найти:

  1. эпидермис,
  2. cocoчковый слой дермы;
  3. сетчатый слой дермы;
  4. волосяную воронку;
  5. стержень волоса;
  6. корень волоса;
  7. мозговое вещество;
  8. кутикулу;
  9. волосяную луковицу;
  10. внутреннее корневое эпителиальное влагалище;
  11. наружное корневое эпителиальное влагалище;
  12. корневое дермальное влагалище;
  13. базальный слой клеток концевого отдела;
  14. промежуточный слой себоцитов;
  15. центральный слой — разрушающиеся себоциты; 1
  16. выводной проток сальной железы;
  17. мышцу, поднимающую волос;
  18. потовые железы.

ВИДЕО I

Ситуационная задача 01-43

Дополнительный материал

  1. Электронная микрофотография. Базальный слой эпидермиса кожи. «Атлас», 1970, стр. 339, рис. 462.
  2. Электронная микрофотография. Шиповатый слой эпидермиса кожи. «Атлас», 1970, стр. 343, рис. 466.
  3. Электронная микрофотография. Клетки сальной железы. «Атлас», 1970.

Кожа образует внешний покров организма. К производным кожи относят волосы, ногти, потовые и сальные железы, молочные железы. Последние тесно связаны с половой сферой, поэтому изучаются в соответствующем разделе.
Кожа состоит из многослойного плоского ороговевающего эпителия — эпидермиса, соединительнотканной части — дермы с сосочковым и сетчатым слоями и гиподермы — подкожной жировой основы. Эпидермис происходит из эктодермы, а соединительнотканная часть кожи — из дерматомов (производных сомитов).
Функции кожи разнообразны. Она защищает организм от повреждений, микроорганизмов, участвует в обмене веществ, в водносолевом обмене, через нее выделяется вода, соли, молочная кислота и продукты азотистого обмена (эти процессы усиливаются при ряде заболеваний), в тепловом обмене, в синтезе витамина Д. Кожа является депо крови (до 1 л крови может депонироваться в коже) и огромным рецепторным полем, благодаря обилию в ней нервных окончаний.

Эпидермис — многослойный плоский ороговевающий эпителий. В зависимости от толщины эпидермиса, количества его слоев, различают «толстую» кожу (ладони, подошвы ног) и остальную «тонкую». В эпидермисе «толстой» кожи (кожа пальца) различают 5 слоев эпителиоцитов или эпидермоцитов: базальный, шиповатый, зернистый, блестящий и роговой. Эпидермис — это в основном дифферон эпителиоцитов (эпидермоцитов) (или кератиноцитов). Базальный слой представлен цилиндрическими эпителиоцитами, расположенными на базальной мембране. Среди них имеются стволовые клетки, являющиеся родоначальниками дифферона клеток 98 эпидермиса. За счет деления эпителиоцитов базального слоя обновляется эпидермис. Поэтому базальный слой называют ростковым слоем эпидермиса. Кроме того, в базальном слое имеются меланоциты — пигментные отростчатые клетки, не относящиеся к дифферону эпителиоцитов. В меланоцитах нет тонофибрилл, десмосом, характерных для эпителиоцитов базального и шиповатого слоев, но содержатся зерна пигмента — меланина, накапливающиеся в особых тельцах — меланосомах. Меланоциты имеют неврогенное происхождение. Образуется меланин в них при окислении аминокислоты тирозина под влиянием ферментов тирозиназы и ДОФА — оксидазы. Поэтому меланоциты дают положительную реакцию на ДОФА-оксидазу, что используется в диагностике меланом.
Эпителиоциты, внутриэпидермальные макрофаги, нормальные меланоциты не дают положительной ДОФА-реакции, они захватывают готовый меланин при выделении его из меланоцитов. К внутриэпидермальным макрофагам относят клетки Лангерганса — отростчатые клетки с аргирофильными гранулами в виде теннисных ракеток. Меланосом эти клетки не имеют. Располагаются отростчатые клетки Лангерганса в базальном и шиповатом слоях. Шиповатый слой представлен несколькими слоями тесно расположенных эпителиоцитов полигональной формы с округлыми ядрами и большим количеством тонофибрилл — признаком начала ороговения. Зернистый слой состоит из 2 — 3 рядов уплощенных эпителиальных клеток, содержащих зерна кератогиалина с пучками фрагментированных тонофибрилл и ламелярными тельцами — разновидностью лизосом (кератосом). Последние содержат гидролитические ферменты, помогающие слущиванию роговых чешуек в верхних слоях эпидермиса, а также имеют липиды, предохраняющие кожу от диффузии в нее воды. В этом слое клеток начинается процесс обратного развития их ядер и органелл. В следующем блестящем слое (2 — 3 слоя плоских клеток) уже выражены деструктивные процессы ядер и органелл клеток. Этот слой эпителиоцитов пропитан элеидином, образованным из белков тонофибрилл и кератогиалина. Блестящий слой отсутствует в эпидермисе «тонкой» кожи. Самый поверхностный слой эпидермиса состоит из ороговевших эпителиальных клеток, завершивших свой цикл. Это роговые чешуйки, содержащие мягкий кератин и пузырьки воздуха. В процессе их слущивания играют большую роль кератосомы. Они выходят в межклеточное веществ, их ферменты лидируют десмосомы, и роговые чешуйки отпадают. Ороговение в эпидермисе кожи относят к мягкому. Оно проходит через промежуточные стадии кератогиалина и элеидина в отличие от твердого ороговения (без промежуточных стадий) в волосах и ногтях. В гистогенетическом ряду эпидермоцитов клетки проходят полный жизненный цикл с появлением из стволовых клеток базального слоя, процессов деления, роста, дифференцировки, постепенной кератинизации, передвижения в вышележащие слои, деструкции органелл и ядер, процессов превращения в роговые чешуйки и их удаления с поверхности кожи. На смену закончившим свой жизненный цикл клеткам приходят новые, следующие поколения клеток. И так происходит постоянное обновление клеточного состава эпидермиса.

Дерма, собственно кожа, подразделяется на сосочковый и сетчатый слои. Сосочковый слой расположен сразу под эпидермисом и представлен рыхлой волокнистой неоформленной соединительной тканью с большим количеством кровеносных капилляров и рецепторов, в том числе осязательных телец Мейснера. Граница эпидермиса и сосочкового слоя дермы неровная. На коже пальца имеются высокие соединительнотканные сосочки, вдающиеся в эпидермис. Это обстоятельство определяет рельеф кожного рисунка, неповторимого у каждого человека. Сосочковый слой выполняет в основном трофическую функцию. Сетчатый слой состоит из плотной волокнистой неоформленной соединительной ткани и обеспечивает прочность кожи. В этом слое расположены кровеносные сосуды, нервные стволики, потовые железы, нервные окончания, в том числе инкапсулированные пластинчатые тельца Фатер-Пачини, а в коже с волосами также находятся корни волос с сальными железами и гладкими миоцитами. Глубже следует подкожная основа — гиподерма. Она амортизирует действие механических факторов на кожу, участвует в терморегуляции кожи. В этой части кожи имеются скопления жировых клеток, разделенных пучками коллагеновых волокон.

Волосы — это ороговевшие эпителиальные нитевидные придатки кожи. Источником их развития является эпидермис, врастающий в дерму в виде тяжей на 3 месяце эмбриогенеза. Перед рождением или сразу после рождения первые эмбриональные волосы выпадают и заменяются пушковыми. Затем происходит замена волос на более грубые, окончательные, среди которых различают три типа волос: длинные (голова, борода, усы), щетинистые (брови, ресницы), и пушковые (на остальной части тела). Окончательные волосы подвергаются периодической смене. В волосах различают стержень, находящийся на поверхности кожи, и корень, заканчивающийся расширением — волосяной луковицей, расположенной в толще кожи. Волосы состоят из мозгового, коркового вещества и кутикулы. Мозговое вещество, расположенное в центре, состоит из частично ороговевших клеток c вытянутыми уплотненными ядрами, с мягким кератином (зерна трихогиалина), пузырьками газа и пигментом. Мозговое вещество отсутствует в пушковых волосах и стержне длинных и щетинистых волос. Корковое вещество, прилегающее снаружи к мозговому, представлено плоскими роговыми чешуйками с твердым кератином, пузырьками газа и пигментом. Кутикула волоса расположена снаружи от коркового вещества и представлена одним слоем черепицеобразно расположенных чешуек, содержащих твердый кератин и не имеющих пигмента. Матрицей для роста волос служит волосяная луковица, содержащая мелкие живые эпителиальные клетки, способные к размножению. В волосяную луковицу вдается соединительнотканный волосяной сосочек с сосудами и нервами обеспечивающими нервно-трофическое влияние на волосяную луковицу. Корень волоса окружается внутренним и наружным эпителиальными влагалищами и волосяной сумкой. Внутреннее эпителиальное корневое влагалище, содержащее мягкий кератин, является производным волосяной луковицы и состоит из 3 слоев: кутикулы, прилежащей к кутикуле корня волоса, внутреннего гранулосодержащего слоя и наружного (бледного) эпителиального 100 слоя. Наружное эпителиальное корневое влагалище образовано богатыми гликогеном клетками базального и шиповатого слоев эпидермиса. Волосяная сумка или корневое дермальное влагалище волоса состоит из базальной мембраны, к которой снаружи последовательно прилегает внутренний циркулярный слой соединительнотканных волокон и наружный — продольный слой волокон. В волосяную сумку вплетается мышца, поднимающая волос, состоящая из гладких миоцитов и идущая в косом направлении к сальной железе.

Сальные железы — это простые альвеолярные, связанные с корнями волос, разветвленные железы, секретирующие по голокpиннoму типу. Секрет сальных желез (кожное сало) является жировой смазкой для волос и эпидермиса. Железы состоят из выводных протоков и концевых секреторных отделов. Концевые отделы образованы эпителиальными экзокринными клетками — себоцитами. Различают три слоя этих клеток: наружный — ростковый с темными ядрами; промежуточный — с дифференцирующимися полигональными клетками с четкими клеточными границами и ядрами, с накапливающимися в цитоплазме жировыми каплями; и центральный слой погибающих, дегенерирующих клеток со сморщенными ядрами и гомогенизирующейся цитоплазмой. Выводной проток железы состоит из многослойного эпителия и открывается в волосяную воронку — углубление эпидермиса в месте перехода стержня волоса в его корень.

Потовые железы — встречаются практически во всех участках кожи. Это простые трубчатые неразветвленные железы. Концевые отделы располагаются в сетчатом слое, а выводные протоки, выстланные двуслойным эпителием, проходят через оба слоя дермы и эпидермис и открываются на поверхности кожи потовыми порами — штопорообразными целями между эпителиоцитами. В концевом отделе, закрученном в виде клубочка, имеются секреторные клетки кубической или цилиндрической формы — экзокриноциты-судорифероциты. Они бывают светлые, выделяюшие воду ионы металлов, содержащие много гликогена и имеющие глубокие складки плазмолеммы у базальной поверхности, и темные, содержащие много рибосом и секреторных гранул. Эти клетки секретируют белково-полисахаридные вещества. Кроме секреторных клеток на базальной мембране концевых отделов располагаются миоэпителиоциты, способствующие своими сокращениями выделению секрета. По типу секреции потовые железы бывают мерокриновые — более многочисленные и распространенные по всему телу, а также апокриновые (в подмышечных впадинах, вокруг ануса, на больших половых губах). Секрет последних богаче белковыми веществами, они крупнее, их секреторные клетки имеют оксифильную окраску (в отличие от слабо базофильной в мерокриновых) и более низкую активность щелочной фосфатазы по сравнению с мерокриновыми железами. Функционирование апокриновых потовых желез тесно связано с функцией половых желез.

Методичка МГМСУ в формате PDF — скачать и читать со страницы 97 (Кожа и ее производные.)
Методичка МГМСУ. Частная гистология.

Читать другие методички

Учебник «Частная гистология» В.Л.Быков для самостоятельного изучения

Препарат №4 Кожа с волосом — МегаЛекции

Препарат №1 Трахея

1.Слизистая выстилает орган изнутри.

2.Подслизистая следует за слизистой, без резкой границы переходит в соединительную ткань надхрящницы хрящевых полуколец.

3.Фиброзно – хрящевая наиболее выражена, ограничена фиброзной тканью от прилежащих оболочек, в силу сморщивания мягких тканей при фиксации и заливке концы хрящевых полуколец стягиваются и поэтому смещены друг за друга.

1.Поверхность слизистой выстлана эпителием:

А) Однослойным многорядным призматическим мерцательным, в котором на препарате различимы бокаловидные, реснитчатые, базальные клетки

Б) Собственная пластинка находится под эпителием, она представлена рыхлой соединительной тканью, здесь могут быть лимфоидные узелки и отдельные, циркулярно расположенные, пучки гладких мышечных клеток, РСТ составляет основу оболочки, в ней хорошо заметны поперечно.

В) Перерезанные эластические волокна, которые как сильно преломляющие свет точки.

2.Подслизистая представлена РСТ, в ней находятся сложные белково –слизистые железы, выводные протоки которых открываются на поверхности слизистой оболочки и кровеносные сосуды.

3.Фиброзно-хрящевая, у нее на заднем поверхности гиалиновые полукольца замкнуты:

А) На наружной поверхности хряща находится надхрящница.

Б) Гладкомышечные пучки расположены между концами хрящевого полукольца.

4.Адвентициальная оболочка представлена РСТ.

Препарат №2 Легкое

1.Сегментарный бронх имеет 4 оболочки:

А) Эпителий – многорядный однослойный призматический мерцательный, различимы бокаловидные клетки.

Б) Собственная пластинка – располагается под эпителием, в ее рыхлой соединительной ткани, могут быть лимфоидные фолликулы.

В) Мышечная пластинка – ее пучки гладкомышечной ткани идут в косо циркулярном направлении.

2.Бронх малого калибра имеет две оболочки:

А) Слизистая – эпителий однослойный двурядный мерцательный.

Б) Адвентициальная оболочка в виде тонкой соединительно-тканной прослойки окружает бронх с поверхности.



3. В терминальной бронхиоле оболочек нет, следуют слои:

А) Эпителий – однослойный кубический реснитчатый.

Б) Тонкая прослойка рыхлой соединительной ткани снаружи.

4.В респираторной бронхиоле легкого от прежней стенки остались участки, выстланные однослойным кубическим эпителием, под ним – отдельные гладкомышечные клетки, с поверхности – тончайшая прослойка рыхлой соединительной ткани.

5.Альвеолярный ход содержит обилие альвеол в стенке, между устьями альвеол сохраняются единичные эпителиальные клетки, под базальной мембраной – единичные гладкомышечные клетки, кровеносные капилляры.

6.Альвеолярные мешочки сплошь образованы альвеолами, на препарате они преобладают.

 

Препарат № 3 Кожа пальца человека

1.Эпидермис – многослойный плоский ороговевающий эпителий, лежащий на базальной мембране. В эпидермисе различают несколько слоев эпителиальных клеток, их структура меняется от базального слоя до рогового.

2.Слой базальных клеток, имеющих низко-цилиндрическую или кубическую форму, ядра клеток овальные, цитоплазма базофильная за счет синтеза белка кератина. В этом слое есть стволовые клетки, поэтому обнаруживаются фигуры митоза. Клетки образуют сплошной слой и имеют контакты в виде десмосом.

3.Шиповатый слой, который представлен несколькими рядами крупных клеток неправильной формы. В нижних слоях можно видеть немногочисленные митозы.

4.Зернистый слой располагается выше и состоит из двух – трех рядов уплощенных клеток, содержащих базофильные гранулы кератогиалина. Ядро клеток плоское, интенсивно окрашено.

5.Блестящий слой находится над зернистым и виден в микроскоп как розовая полоска, границы клеток нечеткие, ядра не видны.

6. Роговой слой – это чешуйки, не содержащие ядра и органоидов, они расположены в несколько слоев. Роговой слой образуется в процессе кератинизации и состоит из безъядерных чешуек, бывших клеток, заключенных в межклеточное вещество. Чешуйки постепенно слущиваются, за счет разрушения десмосом. Между чешуйками расположен цемент, состоящий из смеси липидов, которые обеспечивают водонепроницаемость рогового слоя. В составе эпидермиса присутствуют клетки: меланоциты, они составляют 10-25% клеток базального слоя, имеют отростчатую форму и содержат меланосомы.

2.Дерма состоит из 2 слоев:

7.Сосочковый слой – это рыхлая волокнистая неоформленная соединительная ткань, которая формирует сосочки. Якорные филаменты от базальной мембраны направляются к коллагеновым волокнам сосочкового слоя. Эпидермис строго повторяет контуры этих сосочков, образует генетически обусловленные гребешки. Здесь находятся мелкие кровеносные сосуды и гладкие мышечные клетки.

8.Сетчатый слой – образован плотной неоформленной волокнистой соединительной тканью. Коллагеновые и эластичные волокна переплетаются, образуя сеть.

9.Потовые железы. Это простые трубчатые с закрученным в виде клубочка концевым отделом. Они располагаются в сетчатом слое дермы, либо на границе сетчатого слоя и гиподермы. Выводной проток поднимается вертикально по отношению к эпидермису и открывается на поверхности кожи порой. В концевых отделах присутствуют три типа клеток: темные, светлые эпителиальные и миоэпителиальные.

3.Гиподерма – подкожная клетчатка, образована скоплениями белых адипоцитов.

 

Препарат №4 Кожа с волосом

Волос состоит из: стержня, выступающего над кожей(1) и корня(2), погруженного в кожу до уровня подкожной жировой клетчатки. Корень находится в волосяном мешке, его стенка образована эпителиальными влагалищами, вместе они составляют фолликул(3), в который вдается в дерму и гиподерму и оплетен соединительнотканной волосяной сумкой(4). Вблизи перехода корня в стержень в эпидермисе образуется углубление – воронка(5), куда впадают протоки апокриновых потовых и сальных желез. На дистальном

Конце волоса находится волосяная луковица(6),

В которую врастает соединительнотканный волосяной сосочек(7), с большим количеством кровеносных сосудов, для питания луковицы.

Стержень волоса имеет:

8. Мозговое вещество, которое состоит из крупных слабо пигментированных вакуолизированных клеток, лежащих наподобие монетных столбиков.

9. Корковое вещество, оно располагается вокруг мозгового состоит из плоских роговых чешуек, заполненных твердым кератином, зернами пигмента и пузырьками воздуха.

10.Кутикула волоса состоит из клеток, превращающихся в роговые чешуйки, содержащие твердый креатин, которые черепицеобразно накладываются друг на друга и лишены пигмента.

11.Внутреннее эпителиальное корневое влагалище в нижнем отделе входят три слоя: кутикула, внутренний, слой Гекели (образованный кубическими клетками).

12.Наружное эпителиальное корневое влагалище является продолжением эпидермиса в волосяную луковицу.

13.Мышца, поднимающая волос, состоит гладкомышечных клеток, одним концом она вплетается в волосяную сумку, другим в сосочковый слой дермы.

14.Сальные железы – то простые альвеолярные разветвленные железы секретирующие по голокриновому типу. Корневые отделы представлены альвеолами или дольками, образованными себоцитами(15). Между альвеолами находятся рыхлая неоформленная соединительная ткань.

 

 

Тема: Мочевыделительная система

Препарат № 1 Почка

1.Фиброзную капсулу покрывает орган с поверхности:

Фиксируем внимание на то, что паренхима органа предеталена нефронами, строма выражена слабо и состоит из рыхлой соединительной ткани.

2.Корковое вещество располагается сплошным слоем но капсулой.

3.Почечное тельце – это округлое образование, включает в себя – два листка капсулы Шумлянского-Боумена: париетальный(4) представлен плоским эпителием, выстилающим полость капсулы: висцеральный(5) – срастается с капиллярным клубочком(6). Полость капсулы(7) и сосудистый клубочек, состоящий из петель чудесной сети занимают наибольшую часть капсулы: канальцы нефрона занимают основную часть площади среза коркового вещества и перерезаны в различных направлениях.

8.Извитые канальцы I-го порядка имеют следующие морфологические признаки: узкий звездчатый просвет, клетки кубической или призматической формы, на апикальной поверхности клеток находится щеточная каемка а в базальной части – базальная исчерченность, границы между клетками нечеткие, цитоплазма мутная.

9.Извитые канальцы II-го порядка представлены клетками низкими цилиндрическими, они имеют прозрачную цитоплазму, более широкий просвет канальца, щеточной каемки нет, поэтому просвет более ровный.

10.Мозговое вещество занимает центральную часть органа, врастает в корковое в виде мозговых лучей и включает:

11.Нисходящий отдел петли Генли, он выстлан однослойным плоским эпителием с выбухающими в просвет ядрами, диаметром около 15мкм, просвет хорошо виден.

12.Восходящий отдел петли Генли выстлан кубическим эпителием, просвет небольшой.

13.Собирательные трубочки представлены в основном светлым кубическим эпителием, просвет значительный.

14.Пирамида в центре мозгового вещества, выступает как признак дольчатого органа.

15.К элементам ЮГА относится плотное пятно, структура в виде плотного скопления ядер клеток в стенке дистального канальца в том месте, где он проходит рядом с почечным тельцем между приносящей и выносящей артериолами.

16.Кровеносные сосуды.

17.Строма органа выражена крайне слабо, определяется в виде прослоек вдоль сосудов.

 

 

Препарат №2 Мочеточник

I. Слизистая оболочка образует глубокие складки и состоит из:

2.Многослойного переходного эпителия, выстилающего слизистую оболочку изнутри.

3.Собственной пластинки, представленной РСТ, в ней находятся мелкие кровеносные сосуды(4).

II. Подслизистая оболочка – ее соединительная ткань(5) срастается с РСТ слизистой оболочки.

Иногда в подслизистой оболочке, в нижней части мочеточника, обнаруживается альвеолярно–трубчатые мелкие железы.

III. Мышечная оболочка.

В верхней половине состоит из двух слоев: внутреннего(6) продольного и наружного(7) циркулярного. В нижней части органа оболочка имеет три слоя.

IV. Адвентициальная оболочка состоит из рыхлой соединительной ткани.

 

 


Рекомендуемые страницы:


Воспользуйтесь поиском по сайту:

Препарат № 16. Волос человека (поперечный срез)  

  (рис. 16)
Для получения хорошего поперечного среза надо вырезать из фиксированного материала (см. предыдущий препарат) квадратный кусочек кожи, определить при помощи лупы направление волос (следует помнить, что волосы растут под некоторым углом к поверхности) и затем срезать бритвой нижшою поверхность кожи так, чтобы на плоской пластинке кожи волосы оказались стоящими вертикалыщ. Такой срез не пройдет параллельно поверхности кожи.*.
Вследствие различной Шубины залегания волос поперечные срезы на препарате проходят на разных уровнях корня волос. При малом увеличении видно, что волосы располагаются группами, окруженными плотной соединительной тканью. В области подкожной клетчатки волосы лежат среди жировой ткани и потовых желез; ближе к поверхности кожи их окружают волокна сетчатого слоя и сальные железы. При большом увеличении следует рассмотреть три поперечных среза, прошедших через разные участки волоса.
  1. Срез волоса через область залегания сальных желез (верхняя часть корня). Эту область легко определить, так как рядом с волосом всегда находятся участки перерезанной сальной железы. Они представляют собой группы клеток, находящихся на разных стадиях образования кожного сала. В центре волоса хорошо видно корковое вещество, одетое кутикулой. Мозговое вещество обычно различить трудно. Ядра коркового слоя срезаны поперечно и имеют вид мелких круглых образований, сплошь заполняющих корковое

зальным цилиндрическим сло- ем. Стекловидная мембрана, отделяющая корневое влагалище от соединительнотканной волосяной сумки, здесь видна плохо. В волосяной сумке внутренний кольцевой слой можно отличить от наружного продольного слоя по форме ядер: во внутреннем слое ядра удлиненные и расположены циркулярно, в наружном слое они округлые, так как срезаны поперечно.

  1. Срез через волос на уровне раздвоения внутреннего волосяного влагалища (область несколько выше шейки). На этом срезе хорошо

Рис. 16. Волос человека (поперечные
срезы):
/—срез через область'залегания сальных желез; // — срез на уровне раздвоения внутреннего волосяного влагалища; III — срез через луковицу (увеличение ок. 7, об. 20):
/—корковое вещество, 2 — кутикула волоса, 3 - внутреннее волосяное влагалище, 4 — наружное волосяное влагалище, 5 — циркулярный слой волосяной сумки, 6 — продольный слой волосяной сумки, 7 — сальная железа, 8 —жировые клетки, 9 — кутикула корневого влагалища, 10 — слой Гекели, // —слой Гейле, 12 — стекловидная оболочка, 13 — сосочек волоса, 14 — клетки луковицы видно корковое вещество, окруженное кутикулой в виде довольно широкой полосы с круглыми ядрами. К кутикуле стержня вплотную примыкает кутикула корневого влагалища — очень тонкая полоска с узкими ядрами. Ясно видно, что внутреннее корневое влагалище разделено на два слоя. Внутренний слой
Гекели — более широкий с круглыми ядрами и зернами красного пигмента, наружный слой Генле более тонкий — с узкими деформированными ядрами. Наружное волосяное влагалище здесь имеет только три-четыре слоя клеток; базальный цилиндрический слой обычно не развит. Стекловидная мембрана хорошо видна. Волосяная сумка такая же, как на предыдущем срезе.
  1. Срез через луковицу волоса и волосяной сосочек. На срезе в центр волоса попадает волосяной сосочек, образованный рыхлой соединительной тканью с ядрами сое- • динительнотканных клеток. Сосочек окружен тканью луковицы; это — скопление живых клеток с ярко окрашенными ядрами, часто находящимися в состоянии митоза. Никакого разделения на слои здесь нет.

ПРЕПАРАТЫ - Med24info.com


А.              Кожа с большим ороговением (срез кожи пальца, рис. 16-1). При малом увеличении видно, что в толстой коже имеется наружная эпителиальная часть — эпидермис. Под эпидермисом располагается соединительнотканная часть кожи — собственно кожа, или дерма. Ещё глубже находится подкожная клетчатка.
Эпидермис представлен многослойным плоским ороговевающим эпителием. Поверхность эпителия неровная, что обусловлено вдающимися в эпителий сосочками собственно кожи. В эпидермисе различают несколько слоёв.
Ростковый слой (stratum germinativum) состоит из цилиндрических клеток базального слоя (stratum basale), лежащих на базальной мембране, и слоя шиповатых клеток (stratum spinosum), образованного 3-10 слоями.
Зернистый слой (stratum granulosum) расположен над ростковым слоем и состоит из 2-3 слоёв клеток. Зёрна кератогиалина имеют чёрный цвет.
Блестящий слой (stratum lucidum) находится над зернистым, клетки содержат элеидин — продукт, образующийся из кератогиалина. Клетки не имеют ядер и органелл. Границы между клетками незаметны. На препарате слой выглядит как блестящая гомогенная полоска. Роговой слой (stratum comeum). В этом самом поверхностном слое эпидермиса толстым пластом расположены роговые чешуйки, совокупность которых образует на препарате широкую равномерно окрашенную полосу на поверхности эпидермиса. Соединительнотканная часть кожи состоит из двух слоёв. Непосредственно под эпидермисом, вдаваясь в виде сосочков в эпителий, располагается рыхлая волокнистая соединительная ткань — сосочковый слой (stratum papillare). Тонкие коллагеновые и эластические волокна переплетаются между собой. Здесь же располагаются клетки соединительной ткани: фибробласты, макрофаги, тучные клетки и другие. Сосочковый слой в более глубо-
ких частях кожи переходит в сетчатый слой (stratum reticulare), представленный плотной волокнистой неоформленной соединительной тканью Б Кожа волосистой части головы (препарат кожи с малым ороговением из волосистой части головы) Срез сделан параллельно поверхности кожи, поэтому корни волос на препара те видны в поперечном сечении Так как корни волос залегают в сетчатом слое на разных уровнях, на препарате видны срезы через корни волос на разном расстоянии от волосяной луковицы (рис 16-15) Под большим увеличением микроскопа видно, что центральную часть поперечно срезанного корня волоса занимает собственно волос, в центре которого можно различить мозговое вещество, а снаружи от него располагается корковое вещество, покрытое кутикулой волоса Мозговое и корковое вещество состоит из ороговевших эпителиальных клеток, содержащих пигментные гранулы Кутикула волоса представлена одним слоем быстро ороговевающих эпителиальных клеток и обращена к кутикуле внутреннего корневого влагали ща, расположенного снаружи от собственно волоса Во внутреннем корневом влагалище разли чают три слоя К его кутикуле прилегает внутренний слой полуороговевших эпителиальных клеток — слой Хаксли По периферии от него располагается наружный слой ороговевших клеток — слой Хенле Снаружи от внутреннего корневого влагалища локализуется толстый пласт из 6-10 слоев эпителиальных клеток — наружное корневое влагалище В нем наруж ные клетки имеют цилиндрическую форму и располагаются на базальной (стекловидной) мембране, вокруг которой находится волосяная сумка, состоящая из внутреннего и наружного слоев волокнистой соединительной ткани Во внутреннем слое волокна соединительной ткани проходят преимущественно циркулярно, в наружном слое — продольно

Рис 16-15 Поперечные срезы волосяного фолликула на разных уровнях А — средняя часть, Б — ближе к волосяной луковице [из Voss Н, 1957]
В.              Кожа с малым ороговением (рис. 16-3) состоит из тех же слоёв, что и кожа с большим ороговением: эпидермиса, собственно кожи и подкожной клетчатки. Эпидермис значительно тоньше, в нём отсутствует блестящий слой и иногда зернистый. Роговой слой относительно тонкий, до 10 мкм, содержащий 10-15 слоёв роговых чешуек.
Сальная железа. Эта простая разветвлённая альвеолярная железа связана с волосом. Секреторный отдел состоит из нескольких альвеол, по периферии которых располагаются камбиальные клетки (рис. 16-16). Центральная часть секреторного отдела представлена крупными клетками, содержащими капли жира. Железа имеет короткий выводной проток. Потовая железа — простая неразветвлённая трубчатая (рис. 16-1 и 16-5). Выводной проток длинный, покрыт двух-трёхслойным эпителием. Секреторный отдел — трубочка, свёрнутая в клубочек, — на препарате виден как группа трубочек, перерезанных в различных направлениях. Секреторный отдел выстлан одним слоем кубических секреторных клеток, у основания которых можно рассмотреть удлинённые ядра миоэпителиальных клеток.
Рис. 16-16. Сальная железа кожи щеки. Простая альвеолярная разветвлённая железа. Рядом с железой расположен волосяной фолликул. Выводной проток вместе с волосяной воронкой открывается на поверхности кожи [из: Кульчицкий НК, 1909]
ЛИТЕРАТУРА
Остроумов ПМ Об окончаниях нервов в волосах животных. Казань- Издательство Императорского Университета, 1900
Рогннский ЯЯ, Левин МГ Антропология, М.: Высшая школа, 1978
Эдельсон PJI, Финк ДМ Иммунологическая функция кожи. В мире науки, 1985, №8, с. 16-24.
Malinovsky L Mechanoreceptors and free nerve endings. In: Biology oi the integumentum. Vertebrates. Heidelberg: Springer, 1986, 2 : 534-559
Montagna W The structure and function of the skin. 2nd ed. New York. Academic Press, 1962
Munger BL Patterns of organization of peripheral sensory receptors. In: Handbook of sensory physiology. Principles of receptor physiology. Berlin: Springer, 1971, I, 523-556
ВОПРОСЫ
Пояснение. За каждым из перечисленных вопросов или незаконченных утверждений следуют обозначенные буквой ответы или завершения утверждений. Выберите один ответ или завершение утверждения, наиболее соответствующее каждому случаю.
  1. Какая ткань образует сосочковый слой кожи?
  1. Плотная неоформленная (Б) Рыхлая неоформленная
  2. Плотная оформленная (Г) Ретикулярная

(Д) Лимфоидная
  1. Роль каких иммунокомпетентных клеток выполняют клетки Лангерханса}
  1. Т-хелперов (Б) Макрофагов
  2. Т-супрессоров (Г) В-лимфоцитов (Д) Т-киллеров
  1. Какие клетки образуют кожный пигмент и дают положительную реакцию на ДОФА-оксидазу?
  1. Клетки Меркеля (Б) Клетки Лангерханса
  2. Кератиноциты (Г) Меланоциты

(Д) Пигментные клетки
  1. Меланоциты происходят из:
  1. нервной трубки (Б) нервного гребня
  2. эктодермальных плакод (Г) дерматома

(Д) мезенхимы
  1. Мышца, поднимающая волос, вплетается в:
  1. кутикулу волоса (Б) волосяную сумку
  2. внутреннее корневое влагалище (Г) наружное корневое влагалище (Д) корковое вещество волоса
  1. В каком слое эпидермиса расположены стволовые клетки для кератиноцитов?
  1. Зернистый (Б) Базальный
  2. Блестящий (Г) Роговой

(Д) Шиповатых клеток
  1. Эккриновые потовые железы. Верно всё, КРОМЕ:
  1. ацетилхолин усиливает секреторную активность

(Б) выводные протоки открываются в волосяную воронку
  1. секреторные отделы расположены в сетчатом слое (Г) участвуют в терморегуляции

(Д) при потоотделении секретируют брадикинин
  1. Базальный слой эпидермиса. Верно всё, КРОМЕ:
  1. обеспечивает постоянный рост эпителиального пласта (Б) содержит меланоциты
  2. клетки связаны с базальной мембраной при помощи полудесмосом (Г) в клетках присутствует десмин или виментин

(Д) содержит стволовые клетки для кератиноцитов
  1. Сальные железы. Верно всё, КРОМЕ:
  1. секреторные отделы расположены в сосочковом слое (Б) тип секреции — голокриновый
  2. выводной проток открывается в волосяную воронку (Г) выводной проток короче, чем в потовых железах (Д) секреторные клетки — обновляющаяся популяция
  1. Все утверждения верны, КРОМЕ:
  1. кожа — мощное рецепторное поле

(Б) в эпидермисе кожи образуется витамин D3
  1. эпидермис происходит из эктодермы

(Г) регенерацию кожи обеспечивают камбиальные клетки эпителия и фибробласты (Д) мышца, поднимающая волос, получает двигательную иннервацию от мотонейронов передних рогов спинного мозга
  1. Меланоциты. Верно всё, КРОМЕ:
  1. содержат чувствительный к ультрафиолету фермент тирозиназу (Б) происходят из нервного гребня
  2. меланосомы содержат пигменты меланины (Г) меланосомы транспортируются по отросткам

(Д) причина альбинизма — высокая активность тирозиназы
  1. Клетки Лангерханса. Верно всё, КРОМЕ:
  1. составляют 3% всех клеток эпидермиса (Б) образуют десмосомы с кератиноцитами
  2. несут MHC II класса

(Г) участвуют в реализации иммунной функции кожи (Д) экспрессируют рецепторы Fc-фрагментов IgG и IgE
  1. У больных кожными лимфомами под эпидермисом и в нём самом присутствует множество трансформированных:
  1. кератиноцитов (Б) Т-хелперов
  2. фибробластов (Г) меланоцитов

(Д) клеток Лангерханса
Пояснение. Каждый из нижеприведённых и пронумерованных вопросов 14-20 содержит четыре варианта ответов, из которых правильными могут быть один или сразу несколько. Выберите:
А —              если              правильны              ответы              I,              2 и 3
Б —              если              правильны              ответы              I              и              3
В —              если              правильны              ответы              2              и              4
Г —              если              правилен ответ 4
Д — если правильны ответы I, 2, 3 и 4
  1. Укажите клетки, постоянно присутствующие в зпидермисе:
  1. клетки Лангерханса
  2. меланоциты
  3. лимфоциты
  4. кератиноциты
  1. Меланотропин:
  1. стимулирует транспорт меланосом в меланоцитах
  2. вырабатывается в эпифизе
  3. усиливает передачу меланина кератиноцитам
  4. клетки-мишени — кератиноциты
  1. В сосочковом слое кожи человека присутствуют:
  1. меланоциты
  2. клетки Лангерханса
  3. клетки Меркеля
  4. тучные клетки
  1. Какие клетки эпидермиса участвуют в иммунном ответе?
  1. Т-лимфоциты
  2. Кератиноциты
  3. Клетки Лангерханса
  4. Клетки Меркеля
  1. Клетка Лангерханса:
  1. происходит из костного мозга
  2. промежуточные филаменты состоят из цитокератина
  3. служит Ar-представляющей клеткой
  4. синтезирует меланин
  1. Источником ИЛ-1 в эпидермисе служат:
  1. кератиноциты
  2. Т-лимфоциты
  3. клетки Лангерханса
  4. клетки Меркеля
  1. Чувствительные нервные окончания кожи:
  1. тельце Майсснера
  2. комплекс клетки Меркеля с нервной терминалью
  3. тельце Пачйни
  4. свободное нервное окончание

  Препарат № 15. Волос человека (продольный срез)  

  (рис. 15)
Кусочек кожи из подмышечной впадины человека (используют трупный материал) фиксируют формалином. Отвесные срезы окрашивают гематоксилином с эозином.
Отвесный срез через кожу с волосами следует рассмотреть при малом увеличении. Надо обратить внимание на то, что роговой слой здесь значительно тоньше, чем на ладонной поверхности пальца. На препарате волосы срезаны различно. Это объясняется тем, что они расположены на разной глубине под некоторым углом к поверхности эпидермиса. Для изучения пригодны только такие срезы, которые проходят продольно через центр волоса; при этом корень волоса должен быть виден на всем его протяжении.
Различают корень и стержень волоса. Стержень выступает над поверхностью кожи, корень уходит вглубь под эпидермис, в соединительную ткань. В эпителии, в том месте, где выступает стержень, имеется некоторое углубление (воронка). Нижняя часть корня расширена и образует луковицу, в которую в виде сосочка вдается окружающая соединительная ткань. В сосочке заметны ядра клеток рыхлой соединительной ткани и срезанные мелкие кровеносные сосуды. Через сосочек осуществляется питание и иннервация волоса. Часть корня, находящаяся непосредственно над луковицей, слегка сужена и поэтому называется шейкой. В волосяную воронку корня впадают сальные железы, функционирующие по голокриновому типу. Это простые разветвленные альвеолярные железы с широким коротким про-
2 Кирпичникова, Левинсон
током. Под углом к волосяному мешку расположены волокна гладкой мышечной ткани. Мышцы на препарате часто оказываются срезанными так, что место их прикрепления к волосу не видно; видны лишь пучки мышечных клеток, окрашенные в интенсивно розовый цвет, с характерными вытянутыми ядрами. При помощи этих мышц возможно движение волоса.
Тонкое строение волоса необходимо рассмотреть при большом увеличении. В стержне и корне различают три слоя. Центральную часть волоса образует мозговое вещество, состоящее из полигональных ороговевающих клеток с зернами пигмента; часто между клетками находятся пузырьки воздуха (в молодых волосах мозговое вещество отсутствует). Мозговое вещество окружено корковой частью, содержащей вытянутые клетки с палочковидными ядрами. В клетках и межклеточных пространствах корковой части содержится пигмент. Стержень и корень покрыты кутикулой. Клетки кутикулы легко отличить, так как они черепицеобразно налегают друг на друга и, как правило, лишены ядер и -пигмента. На тангенциально срезанных волосах мозговое вещество не видно, и весь стержень кажется состоящим из коры, покрытой кутикулой. Корень волоса окружен волосяным мешком, построенным из эпителиальной и соединительной ткани, Эпителиальная часть состоит из наружного и внутреннего корневого влагалища. Наружное влагалище прилегает к волосяной сумке и представляет собой впячивание эпидермиса кожи. Внешний слой влагалища состоит из цилиндрических клеток; остальные клетки напоминают клетки росткового слоя. Чем ближе к луковице, тем тоньше становится наружное влагалище.              1
Верхняя часть внутреннего корневого влагалища имеет вид гомогенной полосы, окрашенной в розовый цвет; это — область вполне ороговевших клеток. Нижняя часть внутреннего корневого влагалища разделяется на три слоя. К кутикуле волоса прилегает кутикула влагалища, состоящая из ороговевших клеток; иногда обе кутикулы сливаются. Снаружи от кутикулы расположены слои Гекели и Генле. Слой Гекели — внутренний, он состоит из кубических клеток с плотными ядрами. Эти клетки оро- говевают, в их цитоплазме заметны зерна и глыбки пигмента — трихогиалина, окрашенного эозином в красный цвет. Наружный слой Генле подвергается еще более сильному ороговению. Ядра клеток этого слоя дегенерируют, зерна трихогиалина заполняют все клетки целиком. Вблизи луковицы в слоях Гекели и Генле имеются четко очерченные ядра без признаков дегенера- 'ции. В области же луковицы клеточные слои отсутствуют. Луковица состоит из живых, очень сходных между собой размножающихся эпителиальных клеток с круглыми овальными ядрами, Именно отсюда идет рост корня и стержня волоса. Размножающиеся клетки поднимаются по направлению к поверхности

-воронка волоса. 2-эпидермис, 3 -сальная железа, '4-мышцы, Б — мозговое вещество, ? —корковое вещество, 7 —кутикула волоса, 8 — внутреннее корневое влагалище, 9 — наружное корневое влагалище, 10 — кутикула внутреннего корневого влагалища, —слой Гекели, /2—слой Гейле, 13 — стекловидная оболочка, 14 — циркулярный слой волосяной сумки, 15 —продольный слой волосяной сумки, 1$ — волосяной сосочек, 17 — волосяная луковица, 18— жировые
клетки
кожи, постепенно дифференцируются и образуют все описанные выше структуры волоса. В глубину луковицы вдается волосяной сосочек, состоящий из рыхлой соединительной ткани, в котором проходят многочисленные кровеносные капилляры, приносящие питательные вещества для волосяной луковицы.
Соединительная ткань волосяного мешка одевает весь корень снаружи и образует волосяную сумку* особенно хорошо развитую в нижней части волоса. Волосяная сумка состоит из трех слоев. Наружный слой образован продольными коллагеновыми пучками и эластическими волокнами, направленными вдоль волоса. Между волокнами находятся соединительнотканные клетки с ядрами, также вытянутыми вдоль волоса. В среднем слое пучки и волокна располагаются циркулярно; на препарате они срезаны поперечно. Ядра соединительнотканных клеток имеют рид круглых образований, так как перерезаны поперек. Внутренний слой — почти бесцветная стекловидная оболочка, особенно хорошо заметная в области шейки. 

Гистология.RU: КОЖА 2

Материал взят с сайта www.hystology.ru

Кожа развивается из двух эмбриональных зачатков. Из эктодермы зародыша развивается наружный слой кожи - эпидермис (рис.235). Глубокие слои кожного покрова - дерма и подкожная клетчатка - формируются мезенхимой, продуктом дифференцировки дерматомов зародыша.

Эпидермис кожи представлен многослойным плоским ороговевающим эпителием. Толщина его и степень ороговения специфичны для вида животного, области тела и развития волосяного


Рис. 235. Гистологическое строение кожи:

1 - эпидермис; 2 - кожа; 3 - дерма; 4 - гиподерма; 5 - стержень волоса; б - воронка волосяного фолликула; 7 - корень волоса; 8 - потовый проток; 9 - сальная железа; 10 - мышца волоса; 11 - волосяной фолликул; 12 - потовая железа; 13 - луковица волоса; 14 - сосочек волоса; 15 - подкожная вена; 16 - подкожная жировая ткань.


Рис. 236. Эпидермис кожи без волоса:

1 - собственно роговой слой; 2 - блестящий слой; 3 - зернистый слой: 4 - слой остистых клеток; 5 - цилиндрический слой; 6 - соединительная ткань; 7 - выводной проток потовой железы.

покрова. Наиболее полно представлен эпидермис кожи в областях, не покрытых волосами. Процесс ороговения связан с накоплением клетками специфических фибриллярных белков - кератинов и вторичным их преобразованием. В эпидермисе можно выделить пять слоев: базальный, шиповатый, зернистый, блестящий и роговой. Слои эпидермиса построены в основном из клеток, связанных с процессом ороговения, - кератоцитов (эпидермоцитов).

Базальный слой расположен непосредственно на базальной мембране. Состоит в основном из камбиальных эпидермоцитов и единичных меланоцитов (число меланоцитов относится к числу эпидермоцитов как 1:10). Граница эпидермиса с подлежащей соединительной тканью дермы кожи неровная, что увеличивает площадь их контакта (рис. 236).

Эпидермоциты базального слоя цилиндрической формы. С клетками своего слоя и: расположенного выше шиповатого слоя они связаны десмосомами, а с подлежащей базальной мембраной полудесмосомами. Клетки этого слоя содержат многочисленные органеллы, в том числе и свободные рибосомы, о чем свидетельствует


Рис. 237. Схема ультраструктурной организации отдельных слоев эпидермиса:

1 - базальный; 2 - шиповатый; 3 - зернистый, 4 - блестящий и 5 - роговой слои: 6 - соединительная ткань; 7 - кератоцит; 8 - меланоцит; 9 - десмосома; 10 - полудесмосома; 11 - базальная мембрана; 12 - митохондрии; 13 - комплекс Гольджи; 14 - свободные рибосомы; 15 - зернистая эндоплазматическая сеть; 16 - т оно фибриллы; 17 - пиноцитозные пузырьки; 18 - гранулы меланина; 19 - ядра; 20 - кератосомы; 21, 22 - гранулы кератогиалина (по Заварзину).

базофилия их цитоплазмы. Они составляют камбий эпидермиса, обеспечивающий митотпческим делением пополнение его клеточного состава в соответствии с интенсивностью ороговения клеток вышележащих слоев. Второй вид клеток - меланоциты (рис. 237, 238) имеют длинные ветвящиеся отростки, лежат свободно. Ядра клеток неправильной формы. В цитоплазме содержатся промеланосомы и меланосомы. Меланоциты синтезируют пигмент меланин, формируют меланосомы и передают их кератиноцитам (цитокринная секреция). Поэтому по присутствию меланосом отличить меланоциты от кератиноцитов нельзя. Достоверным отличием меланоцитов на светооптическом уровне является положительная реакция на ДОФА-оксидазу (тирозиназу).

Шиповатый слой представлен несколькими слоями крупных клеток полигональной формы. Многочисленные остистые отростки смежных клеток, связанные десмосомами, образуют межклеточные мостики. Цитоплазма клеток базального и особенно шиповатого слоев содержит многочисленные тонофибриллы, пучки которых заканчиваются в остистых отростках в области десмосом. Пучки тонофибрилл более плотно концентрируются вокруг ядра (рис. 239). В этом слое, кроме эпидермоцитов, встречаются клетки Лангерганса - беспигментные гранулярные дендроциты. Клетка имеет 2 - 5 отростков, распространяющихся до зернистого слоя и базальной мембраны, сильно идентированное или лопастное ядро и светлую цитоплазму. От кератиноцитов их отличает отсутствие тонофибрилл и десмосом, от меланоцитов - отсутствие меланосом и отрицательная реакция на ДОФА-оксидазу. Наиболее характерный признак - наличие в их цитоплазме палочковидных структур и гранул в виде теннисной ракетки. Существует мнение, что эти клетки являются эпидермальными макрофагами.

Зернистый и блестящий слои эпидермиса представлены клетками в последующих стадиях дифференцировки эпителия, в процессе которой клетки постепенно утрачивают органеллы и ядро. Для зернистого слоя характерно присутствие зерен


Рис. 238. Электронная микрофотография меланоцита (1, границы показаны стрелками) и кератоцита (2) (Блум, Фаусет).


Рис. 239. Электронно-микроскопическое строение шиповатого слоя (Блум, Фаусет).


Рис. 240. Электронно-микроскопическое строение зернистого, блестящего и рогового слоев эпидермиса (Блум, Фаусет).

кератогиалина - не ограниченных мембраной участков электроноплотного и базофильного вещества (рис. 240). В цитоплазме присутствуют также сферические ламеллярные гранулы - кератосомы. Они содержат липиды и гидролитические ферменты. Последние активируются в верхних слоях эпидермиса и, возможно, помогают слущиванию роговых чешуек. Липиды выделяются в межклеточные пространства, обеспечивая наземным животным защиту от диффузии воды через кожу и потери жидкости тела. Блестящий слой на светооптическом уровне выглядит гомогенным, на уровне электронной микроскопии видны 2 - 4 слоя плоских клеток, почти лишенных органелл, с разрушающимися ядрами. В цитоплазме присутствуют многочисленные кератиновые фибриллы.

Роговой слой образован многими слоями клеток, завершивших процесс ороговения, - роговыми чешуйками. Роговая чешуйка имеет толстую оболочку и заполнена кератиновыми фибриллами, спаянными аморфным кератиновым матриксом. Между чешуйками располагаются сильно измененные десмосомы. Вместо двух утолщенных областей противоположных мембран, разделенных менее плотным межклеточным промежутком, десмосома представлена теперь плотным тяжем, располагающимся экстрацеллюлярно в межклеточном пространстве. Таким образом, каждая клетка эпидермиса кожи превращается в роговую чешуйку. Корреляция интенсивности размножения камбиальных клеток базального слоя, ороговения и отторжения поверхностных клеток взаимообусловлена.

В эпидермисе нет кровеносных сосудов. Питательные вещества и кислород в него поступают из капилляров дермы. Последняя образует большую площадь контакта с эпидермисом благодаря обилию сосочков и высокой степени их развития.

Собственно кожа, или дерма, - производное мезенхимы. Состоит из двух слоев: наружного - сосочкового и внутреннего - сетчатого (см. рис. 235).

Сосочковый слой образован рыхлой неоформленной соединительной тканью. Богат аморфным веществом. Содержит тонкие пучки коллагеновых волокон, эластическую сеть и значительное количество клеток: фиброцитов, гистиоцитов, ретикулярных клеток, тканевых базофилов и др. Степень развития сосочков коррелирует с толщиной эпителиальной ткани - эпидермиса.

Сетчатый слой состоит из плотной неоформленной соединительной ткани. Для него характерна регионарная специфичность строения. В частности, в сетчатом слое кожи спины имеются толстые пучки коллагеновых волокон, плотно прилегающих друг к другу. Петли вязи волокон ромбовидной формы, ориентированы преимущественно вертикально. Здесь этот слой толще, чем на животе, где ткань более рыхлая с преимущественно горизонтальной ориентацией волокон, что обеспечивает ей большие возможности при растяжении.

Подкожная клетчатка - слой рыхлой неоформленной соединительной ткани с преимущественным содержанием жировых клеток


Рис. 241. Сальные железы кожи:

1 - эпителий стенки выводного протока железы; 2 - волосяная воронка; 3 - просвет выводного протока железы; 4 - разрушающиеся клетки концевого отдела железы; 5 - малодифференцированные клетки концевого отдела железы.

(4). Она подвижно соединяет кожу с подлежащими тканями: обеспечивает подвижность кожного покрова, предохраняет подлежащие ткани от механических повреждений, участвует в теплорегуляции.

Железы кожи. Сальные железы распространены по всему кожному покрову млекопитающих животных. Они отсутствуют в коже сосков вымени, коже носо-губного зеркала, пятачка свиней и мякишей конечностей. По форме сальные железы простые, разветвленные, альвеолярные (рис. 241), их выводные протоки, выстланные многослойным эпителием, открываются в воронку волоса.

Концевые отделы железы образованы многослойным эпителием, клетки которого находятся на различных стадиях процесса голокриновой секреции.

Непосредственно на базальной мембране ацинуса железы лежит слой мелких камбиальных клеток. В них различают округлые или овальные ядра и характерные для цитоплазмы органеллы. В цитоплазме выявляют одиночные или собранные в пучки тонофибриллы. По мере размножения камбиальные клетки дифференцируются и смещаются в центральную зону концевого отдела. Они при этом увеличиваются в размерах. Их ядра сморщиваются и распадаются. В цитоплазме появляются жировые включения. Постепенно смещаясь к выводному протоку, клетки железы перерождаются и, распадаясь, образуют секрет.

У крупного рогатого скота наиболее крупные сальные железы лежат в преанальной области, около носо-губного зеркала, у корня рогов и в области венчика копыта. Их нет в коже, не содержащей волос. Выводной проток открывается в волосяной канал. У овец сальные железы состоят из двух и более долек.

Потовые железы простые, трубчатые, неразветвленные, их концевые секреторные отделы расположены в глубокой зоне сетчатого слоя дермы и образуют более или менее плотные клубки. В концевом отделе потовых желез два вида клеток: кубические - железистые и отростчатые - миоэпителиальные. Последние охватывают отростками концевой отдел железы и, сокращаясь, регулируют эвакуацию секрета через выводные протоки. У лошади, овцы, свиньи и кошки концевой отдел железы образует компактный клубок, тогда как у крупного рогатого скота, коз, собак он только извилист. Различают два вида потовых желез - эккринные (мерокринные) и апокринные. Первые типичны для безволосых участков кожи. Их протоки открываются непосредственно на поверхности рогового слоя кожи. Апокринные потовые железы связаны с волосяным покровом. Их выводные протоки впадают в волосяные фолликулы, несколько выше сальных желез. Секрет апокринных желез богат белками.


Отзывов (0)

Добавить отзыв


Кожа

Глава 11 - Кожа

Кожа покрывает внешнюю поверхность тела и является самым большим органом. Кожа и ее вспомогательные структуры (волосы, потовые железы, сальные железы и ногти) составляют покровную систему . Его основные функции - защита тела от окружающей среды и предотвращение потери воды.

Кожа подразделяется на два типа:

  • Толстая кожа - покрывает ладони кистей рук и подошвы стоп
  • Тонкая кожа - покрывает остальную часть тела

Кожа состоит из двух слоев:

  • Эпидермис - наружный слой многослойного плоского ороговевшего эпителия
  • Dermis - нижележащий слой плотной соединительной ткани неправильной формы, содержащий другие структуры (например, волосяные фолликулы и потовые железы)

Глубоко в дерме находится гиподерма , слой рыхлой соединительной и жировой ткани различной толщины.

Толстая кожа

Толстая кожа встречается только на ладонях рук и подошвах ног, в местах, подверженных значительному истиранию. Он имеет толстый эпидермис и содержит потовые железы, но не имеет волосяных фолликулов и сальных желез.

Тонкая кожа

Тонкая кожа покрывает большую часть тела, кроме ладоней рук и подошв ног. Он имеет относительно тонкий эпидермис и содержит волосяные фолликулы, потовые и сальные железы.

Пигментированная кожа

Меланин - самое важное вещество, определяющее цвет кожи.

Волосяные фолликулы

Волосы на коже головы возникают из волосяных фолликулов , простирающихся глубоко в дерму. Волосяные фолликулы - это инвагинации эпидермиса, которые образуют многослойные цилиндры клеток.

Тельца Мейснера и Пачини

Тельца Мейснера и Пачини - это два типа рецепторов прикосновения / давления, которые находятся в коже.

.

Вступительная глава: Гистологические микротехники | IntechOpen

1.1. Предпосылки и общая подготовка тканей к микроскопическому исследованию

Гистология - это раздел анатомии, который фокусируется на изучении тканей животных и растений. Термин «ткань» обычно относится к совокупности клеток. У человека органы включают два или более типа тканей, включая эпителиальную, соединительную, нервную и мышечную. Слово «гистология» происходит от греческого слова «histos», что означает паутина или ткань, и «logia», что означает отрасль знания.Короче говоря, гистологическая обработка включает получение свежей ткани, ее сохранение (то есть фиксацию), чтобы позволить ей оставаться в как можно более естественном состоянии, разрезание ее на очень тонкие срезы (3–8 микрон), закрепление на предметных стеклах микроскопа, а затем окрашивание срезов, чтобы их можно было наблюдать под микроскопом для выявления различных гистологических компонентов в ткани.

2. Методы

2.1. Подготовка ткани

Для удаления ткани необходимо сначала получить информированное согласие пациента, так как ткань, взятая у живого человека для диагностики или лечения, требует его согласия.Другими словами, пациент должен знать, когда он / она дает согласие, цель удаления ткани (например, диагностика, исследовательские цели и т. Д.) [1]. Точно так же забор ткани у животного требует утверждения процедуры наблюдательным советом учреждения (Комитет по уходу и использованию животных, IACUC) [2, 3]. Важным первым шагом в гистологическом процессе является получение ткани. Этот шаг может быть достигнут с помощью традиционного рассечения тканей или тонкоигольной аспирации под эндоскопическим ультразвуком (EUS) [4].Если выбран первый метод рассечения, важно убедиться, что используются острые инструменты для рассечения, чтобы свести к минимуму раздавливание ткани при разрезании для удаления. Ткань должна быть влажной (например, 0,85% физиологический раствор, изотонический) во время препарирования и обрезки. Ткань должна быть обрезана на 1-2 см по ширине / длине (но не должна быть толщиной более 5 мм). Для легкого проникновения фиксатора должно быть как минимум одна-две стороны среза. На этом этапе важно определить желаемую ориентацию ткани и, если возможно, представить все компоненты ткани на этапе обрезки [5].

2.2. Fixation

Важно поддерживать клетки в как можно более естественном состоянии и предотвращать посмертные изменения в результате гниения (разрушение ткани бактериями или грибами) и автолиза (разрушение ткани собственными ферментами). . В последнем случае, когда клетки умирают, они высвобождают ферменты из своих лизосом и других внутриклеточных органелл, которые начинают гидролизовать (т. Е. Расщеплять или разлагаться при взаимодействии с водой) компоненты ткани, такие как белки и нуклеиновые кислоты, с помощью протеаз и нуклеаз соответственно.Случаи аутолиза наиболее тяжелы в тканях, богатых ферментами (например, в печени, головном мозге, почках и т. Д.), И менее быстрыми в тканях, таких как эластичные волокна и коллаген. Следовательно, очень важно, чтобы фиксация была выполнена как можно скорее после удаления тканей, чтобы предотвратить автолиз и гниение, а также предотвратить осмотический шок, деформацию и усадку ткани. К сожалению, фиксаторы могут непреднамеренно привести к появлению артефактов, которые могут помешать интерпретации клеточной ультраструктуры [6–10].

Поскольку фиксация обычно является первым этапом подготовки ткани к микроскопическому или другому анализу, выбор фиксатора и протокола фиксации очень важен. Фиксатор действует для денатурирования белков посредством (i) коагуляции (вторичных и третичных белковых структур с образованием нерастворимых гелей), (ii) образования дополнительных соединений (сшивание концевых групп аминокислот) или (iii) комбинации коагуляционных и аддитивные процессы. Кроме того, фиксаторы (iv) способствуют прикреплению красителей к определенным компонентам клетки, открывая боковые группы белка, к которым могут присоединяться красители, (v) удаляют связанную воду, чтобы увеличить показатель преломления ткани, чтобы улучшить оптическую дифференциацию, и (vi) изменяют показатель преломления тканей для улучшения контраста для просмотра без окрашивания.Длительная фиксация может привести к химической маскировке конкретных белковых мишеней и предотвращению связывания антител во время протоколов иммуногистохимии. В таких случаях могут быть включены альтернативные методы фиксации в зависимости от биологического материала. Поэтому универсального фиксатора, удовлетворяющего всем требованиям, не существует. У каждого фиксатора есть определенные свойства и недостатки. Не существует единого фиксатора или комбинации фиксаторов, которые обладают / обладают способностью сохранять и обеспечивать демонстрацию каждого тканевого компонента.Некоторые фиксаторы имеют только особое и ограниченное применение, в то время как смеси двух или более реагентов могут потребоваться для использования особых свойств каждого из них. Таким образом, важно определить, какие именно гистологические структуры вы пытаетесь продемонстрировать, а также эффекты краткосрочного и длительного хранения тканей [6–10].

Когда ткань фиксируется, важно, чтобы размер образца оставался маленьким, если это возможно (например, 2–3 мм 3 ), так как увеличенная толщина замедлит проникновение фиксатора.Объем фиксатора должен быть в 20–25 раз больше объема ткани. Брюшину или капсулу вокруг ткани следует удалить или проколоть. Кровь и слизь следует смыть физиологическим раствором. Ткани следует разрезать новым острым лезвием бритвы / скальпелем, а не ножницами, поскольку последнее может привести к сдавливанию ткани и повреждению. Некоторые ткани / органы (например, легкие, глаза и т. Д.) Требуют особого обращения, чтобы фиксатор достиг всех внутренних компонентов. Необходимо следить за тем, чтобы образец имел одну или несколько сторон среза, чтобы гарантировать хорошее проникновение фиксатора.Иногда можно использовать перемешивающий инструмент, чтобы фиксатор достиг всех поверхностей. Ни в коем случае нельзя позволять ткани высыхать. У каждого фиксатора будет свое время фиксации и постфиксационная обработка для наилучшего сохранения клеточных деталей. Типичные фиксаторы, в зависимости от типа ткани и предполагаемой методики микроскопии, могут включать формалин, фиксатор Ценкера, фиксатор Буэна, фиксатор Хелли, фиксатор Карнуа, глутаральдегид, четырехокись осмия, хромовую кислоту, дихромат калия, уксусную кислоту, спирты (этанол, метанол). ), хлорид ртути и ацетон [5–10].

2.3. Микроволновое облучение

Было обнаружено, что микроволновая фиксация полезна для увеличения молекулярной кинетики, приводящей к ускоренным химическим реакциям (т.е. более быстрому времени фиксации, ускоренному сшиванию белков). [11]. В то время как обычная фиксированная формалином, залитая парафином ткань обеспечивает превосходную клеточную морфологию и долгосрочное хранение, фиксация ткани с помощью микроволнового излучения физиологическим раствором с фосфатным буфером [12] или нормальным физиологическим раствором [13] позволяет отказаться от использования вредных и потенциально токсичных фиксация формалина и уменьшение межремонтных сроков.Кроме того, было обнаружено, что окрашивание фиксированных с помощью микроволнового излучения тканей в большинстве тканей было более резким и ярким, чем окрашивание после традиционной фиксации [12, 14]. Интересно, что процедуры холодного микроволнового облучения могут предложить быструю фиксацию и окрашивание тканей для электронной микроскопии и ультраструктурного анализа [15].

2.4. Классификация фиксаторов

Фиксаторы можно классифицировать по трем основным критериям: (i) действие на белки; (ii) типы фиксирующих растворов; и (iii) использовать [6–10, 16, 17].

  1. Действие на белки

    Фиксирующие средства могут иметь два основных действия на белки. Они могут быть коагулянтами или некоагулянтами-фиксаторами. Фиксаторы коагулянта влияют на белки таким образом, что образуется сгусток (сгусток) (например, яичный белок при приготовлении). Напротив, некоагулянтные фиксаторы приводят к более гладкому образованию «геля». Цитоплазма обычно превращается в нерастворимый гель. Кроме того, хотя органеллы сохраняются, обычно наблюдается плохое проникновение в ткани, и более вероятно возникновение артефактов.

  2. Типы фиксирующих растворов

    Существует два основных типа фиксаторов: первичные и составные. Первичные фиксаторы состоят из одного фиксатора в растворе (например, могут быть в абсолютной форме, такой как абсолютный этанол или 10% формалин). Сложные фиксаторы состоят из двух или более фиксаторов в растворе, таких как фиксаторы Ценкера, Хелли и Буэна.

  3. Их использование и механизм действия

    Микроанатомические фиксаторы предназначены для сохранения компонентов органов, тканей или клеток в пространственном отношении друг к другу.Эти фиксаторы в значительной степени являются коагулянтами по природе (клеточные органеллы обычно разрушаются) и используются для световой микроскопии (например, формалин с нейтральным буфером или NBF, Zenker’s, Bouin’s и 10% -ный физиологический раствор). С другой стороны, цитологические фиксаторы сохраняют клеточные структуры или включения (например, митохондрии), часто за счет равномерного проникновения, и позволяют относительно легко разрезать ткани. Они не являются коагулянтами по своей природе и обычно используются для электронной микроскопии. В дальнейшем их можно подразделить на ядерные (например.g., Carnoy’s) и цитоплазматический (например, Helly’s и 10% физиологический раствор).

2.5. Типы фиксаторов
  1. Альдегиды включают формальдегид (формалин в жидкой форме), параформальдегид и глутаральдегид. Ткани фиксируются с помощью сшивающих агентов, которые взаимодействуют с белками и нуклеиновыми кислотами в клетке (особенно с остатками лизина). Формальдегид является хорошим выбором для иммуногистохимических исследований, тогда как формалин (10% нейтральный буферный формалин или NBF) является стандартным.Буфер предотвращает кислотность тканей. Формальдегид обеспечивает низкий уровень усадки и хорошее сохранение клеточных деталей. Этот фиксатор обычно используется при хирургической патологии и аутопсии тканей, требующих окрашивания гематоксилином и эозином (H и E) [6–10, 16, 17]. Поскольку формалин токсичен, канцерогенен и плохо сохраняет нуклеиновые кислоты, предпринимались попытки найти более подходящий заменитель; однако это оказалось трудным [18].

  2. Глутаральдегид вызывает деформацию структуры альфа-спирали в белках, поэтому его не следует использовать для иммуногистохимического окрашивания.Хотя он очень быстро фиксируется, что делает его отличным выбором для электронно-микроскопических исследований, он плохо проникает. Он дает очень хорошие общие цитоплазматические и ядерные детали и готовится в виде забуференного раствора (например, 2% забуференного глутаральдегида). Этот фиксатор лучше всего работает, когда он холодный и забуференный, возраст которого не превышает 3 месяцев [6–10, 16, 17].

  3. Окислители включают фиксаторы перманганата, такие как перманганат калия, фиксаторы дихромата (дихромат калия), четырехокись осмия и хромовая кислота.Хотя эти фиксаторы сшивают белки, они вызывают обширную денатурацию [6–10, 16, 17].

  4. Спирты, включая метанол и этанол, и денатурирующие белки (уксусная кислота) обычно не используются, поскольку они вызывают хрупкость и твердость тканей. Они полезны для цитологических мазков, поскольку действуют быстро и обеспечивают хорошую детализацию ядер. Спирты используются в основном для цитологических мазков. Они быстродействующие, дешевые и сохраняют клетки за счет процесса обезвоживания и осаждения белков.Показано, что метанол эффективен при иммуноокрашивании [6–10, 16, 17, 19].

  5. Ртуть фиксирует ткани неизвестным механизмом. Они содержат хлорид ртути, который является известным компонентом фиксаторов, таких как B-5 и Zenker’s. Эти фиксаторы обладают плохой проникающей способностью и твердостью тканей, но являются быстрыми и обеспечивают отличную детализацию ядра, например, для визуализации кроветворных и ретикулоэндотелиальных тканей (то есть лимфатических узлов, селезенки, тимуса и костного мозга). Эти фиксаторы необходимо утилизировать осторожно.Перед окрашиванием ртутные отложения необходимо удалить (дезенкеризовать), иначе на срезах тканей будут образовываться черные отложения [6–10, 16, 17].

  6. Пикраты включают фиксаторы с пикриновой кислотой, такие как раствор Буэна. Эти фиксаторы имеют неизвестные способы действия. Наиболее распространенным является алкогольный фиксатор Буэна. Этот фиксатор обеспечивает хорошую детализацию ядер и не вызывает большой твердости. Рекомендуется для фиксации яичек, желудочно-кишечного тракта и эндокринных тканей. Этот фиксатор взрывоопасен в сухом виде, поэтому его следует постоянно держать погруженным в спирт [6–10, 16, 17].

  7. Другие факторы, влияющие на фиксацию

    1. Буферизация: фиксацию лучше всего проводить при pH, близком к нейтральному (pH 6–8; формалин забуферен фосфатом при pH 7). Общие буферы включают: фосфатный, бикарбонатный, какодилатный и верональный [6–10, 16, 17].

    2. Проникновение: Каждый фиксатор имеет свою скорость проникновения в ткани. В то время как проникновение формалина и алкоголя лучше, глутаральдегид хуже. Ртутные фиксаторы находятся посередине.Чем тоньше разрезаются секции, тем лучше проплавление [6–10, 16, 17].

    3. Объем: Объем фиксатора должен быть как минимум в соотношении 10: 1. Фиксацию можно улучшить, если фиксирующий раствор менять через регулярные промежутки времени и взбалтывать образец [6–10, 16, 17].

    4. Температура: Если температура, при которой выполняется фиксация, будет увеличена, это приведет к увеличению скорости фиксации. Конечно, слишком сильное нагревание фиксатора может привести к варке или образованию тканевых артефактов [6–10, 16, 17].

    5. Концентрация: Концентрация фиксатора должна быть как можно более низкой, поскольку слишком высокая концентрация может отрицательно повлиять на ткань и вызвать артефакты (формалин лучше всего при 10%, а глутаральдегид лучше всего при 0,25–4%) [ 6–10, 16, 17].

    6. Временной интервал: чем быстрее свежая ткань может быть получена и закреплена, тем лучше для минимизации деградации клеточных органелл и сжатия ядер, что приводит к артефактам. Ткань всегда следует увлажнять физиологическим раствором [6–10, 16, 17].

2.6. Средства для декальцинации

В тканях некоторых животных содержатся отложения солей кальция, которые могут мешать разрезанию, приводя к разрывам и повреждению лезвий. Соединения кальция необходимо удалить химическим путем (обычно с помощью кислоты), прежде чем можно будет использовать типичные гистологические методы для исследования более мягких компонентов. Ткани, требующие декальцинации, включают кости, зубы и кальцинированный хрящ [17, 20–22]. Патологические состояния включают артериосклероз, туберкулез и несколько типов опухолей.Такие ткани следует зафиксировать перед декальцинацией и промыть в проточной воде в течение 12 часов между фиксацией и декальцинацией. Хотя средства для декальцинации обычно удаляют соли кальция и не препятствуют реакции окрашивания, они могут вызывать минимальное искажение клеток и соединительной ткани. Декальцифицирующий агент должен иметь объем в 30–50 раз больше, чем ткань, и для ускорения этого процесса может потребоваться периодическое взбалтывание. Не следует использовать отопление. Обычно процесс завершается, когда прекращается выделение пузырьков.Чрезмерная декальцификация может вызвать серьезное сокращение (чего) при последующем разрезании ткани. Некоторые типичные средства для удаления накипи включают азотную кислоту, жидкость Гудинга и Стюарта, средство для быстрого декальцинации костей (RDO) и хелатирующие агенты. Совсем недавно были открыты новые методы, позволяющие быстрее декальцинировать твердые ткани [23].

2.7. Обезвоживание

После фиксации и для начала этапа обезвоживания (т. Е. Удаления воды) ткани помещают в постепенно возрастающие концентрации дегидратирующего агента (например,g., 70, 85, 95 и 100%), который обычно представляет собой этанол. Метанол, изопропанол и ацетон - альтернативные варианты, в зависимости от обрабатываемой ткани. Важно включить два шага абсолютного спирта (то есть 100%), чтобы убедиться, что вся оставшаяся вода была удалена. Этап дегидратации имеет решающее значение, поскольку вода не смешивается с большинством заливочных сред (например, парафином). Следовательно, ткань необходимо заменять полярными (например, вода) и неполярными (например, органическими реагентами, такими как ксилол) агентами.Если ткань не полностью обезвожена, «очистить» ткань невозможно. Когда на нее воздействуют последующим очищающим агентом (например, ксилолом), ткань остается непрозрачной и кажется молочной. Это потребует повторного обезвоживания ткани. При обезвоживании также удаляется часть липоидного материала из ткани. Если предполагается, что липиды видны, необходимо использовать соответствующий фиксатор, который сохранит липиды до стадии дегидратации (например, тетроксид осмия) [7–10, 16, 17, 21, 22].

2,8. Очистка

Термин «очистка» относится к внешнему виду ткани после обработки обезвоживающим агентом. Многие агенты имеют показатель преломления, аналогичный показателю преломления ткани, что делает ткань «прозрачной» или полупрозрачной. На этом этапе обезвоживающий агент должен быть удален с ткани и заменен растворителем воска. Очищающий агент следует использовать, когда дегидратирующий агент (например, этанол) не смешивается с пропиточной средой / агентом для заливки (т.е.э., парафиновый воск). Это растворитель парафина, который должен смешиваться как с дегидратирующими, так и с добавками для заливки. Выбор подходящего очищающего агента должен основываться на скорости и простоте удаления из среды для заливки (т.е. чем ниже температура кипения, тем быстрее удаление), взаимодействия с тканью, воспламеняемости, токсичности и стоимости. Этап очистки может быть более эффективным при использовании вакуумной системы и должен выполняться в вытяжном шкафу. Типичные очищающие агенты включают ксилол, хлороформ, толуол, бензол, диоксан, четыреххлористый углерод, кедровое масло, изоамилацетат, метилбензоат, метилсалицилат и гвоздичное масло.Из-за потенциальной опасности некоторых из этих химикатов были предложены другие, например, некоторые растительные масла, терпены и алканы. В некоторых гистологических протоколах есть потенциальная возможность обработки ткани без использования очищающего агента (например, ксилола) в качестве безопасной альтернативы опасному воздействию этих химических веществ. Один из таких протоколов включает использование изопропанола как более безопасной альтернативы [7–10, 16, 17, 21, 22, 24–30].

2.9. Инфильтрация / пропитка

Роль инфильтрационного агента состоит в том, чтобы удалить очищающий агент из ткани и полностью пропитать ткань парафиновым воском.Это позволит ткани затвердеть и образовать восковой блок, из которого можно вырезать тонкие гистологические срезы. В идеале консистенция любой затвердевшей заливочной среды должна быть такой же, как и у образца, который она помещает. К сожалению, это случается редко из-за большой разницы в консистенции тканей и большого разнообразия сред для заливки. Обычно используется парафиновый воск, который нагревают до температуры, которая на 2–3 ° C выше его точки плавления. Любая более высокая температура приведет к затвердеванию тканей. Парафиновый воск должен быть в 20–25 раз больше объема ткани.Как правило, ткани переносят непосредственно с очищающего агента на чистый парафин, но иногда с хрупкими образцами необходимо использовать дозированные смеси очищающего агента и парафина. Продолжительность и количество смен парафина, необходимых для пропитки, зависит от размера и плотности ткани. По мере увеличения воздействия парафина на ткань возрастает вероятность усадки и затвердевания. Полная инфильтрация возможна только после полного обезвоживания и полного очищения.Выбор парафина зависит от характера ткани, подлежащей заделке, и требуемой толщины среза. Высокая температура плавления воска (например, 55–60 ° C) увеличивает твердость и уменьшает толщину, до которой ткань может быть разрезана (например, 45–50 ° C считается мягкой). Парафиновый воск можно купить в форме таблеток, пеллет или гранул. К расплавленному парафину можно добавить множество веществ, чтобы изменить его консистенцию и температуру плавления. Обычно процесс инфильтрации происходит с использованием машины для обработки тканей, хотя это может быть выполнено с использованием нагретого контейнера, температура которого на 2–3 ° C выше точки плавления воска.Если в ткани остаются остаточные очищающие агенты или произошла неправильная обработка ткани, это приведет к трудностям при разрезании. Испарение очищающего агента, инфильтрация парафином и удаление любых пузырьков воздуха, застрявших в образце, будут в большей степени облегчены, если процедуры очистки и инфильтрации будут проводиться при пониженном давлении (в вакууме) [7–10, 16, 17, 21, 22, 24–28].

2.10. Embedding

После завершения процесса инфильтрации необходимо получить твердый блок, содержащий ткань.Для этого необходимо сначала покрыть гистологическую основу формы из нержавеющей стали подходящего размера, чтобы соответствовать ткани, глицерином или «смазкой для формы», чтобы предотвратить прилипание воскового блока, содержащего ткань, к металлической форме после затвердевания. Рекомендуется предварительно нагреть металлический блок, чтобы предотвратить преждевременное затвердевание воскового блока. Кроме того, в этом процессе помогает использование нагретых щипцов, которые помогают прижать ткань к основанию металлической формы, а также уменьшают вероятность преждевременного затвердевания.Перед началом процесса инфильтрации кассета для заливки должна быть помещена поверх формы и помечена с названием ткани, фиксатором и датой. Если используется устройство заливки (машина), то комбинированное устройство следует заполнить на две трети расплавленным парафином. Образец следует ориентировать в металлической форме, чтобы гарантировать, что ткань будет разрезана в правильной плоскости сечения. В качестве альтернативы форму можно слегка заполнить, а затем ткань можно поместить в форму и расположить в желаемой ориентации у основания формы.Затем комбинированный блок следует установить на охлаждающий поддон блока заливки (машины) и не трогать до тех пор, пока воск не остынет и не затвердеет. По прошествии достаточного времени кассету и форму следует отделить, а парафиновый блок поместить в микротом для подготовки к разрезанию. Если ткань была тщательно зафиксирована, обезвожена, очищена и инфильтрирована, ткани, залитые парафином, обеспечивают хорошие режущие свойства. В среднем парафиновые блоки остаются прочными и сохраняют свои хорошие режущие качества и характеристики окрашивания на неопределенный срок [7–10, 16, 17, 21, 22, 24–28].

2.10.1. Среда для заливки

Наиболее распространенным пропитывающим агентом и средой для заливки является парафин. Эфирный воск имеет более низкую температуру плавления, чем парафиновый воск, и имеет тенденцию быть более твердым в твердом состоянии, что позволяет использовать эту среду для резки более тонких (например, 2–3 мкм) срезов с минимальной усадкой ткани.

При использовании водорастворимых восков (например, полиэтиленгликольных восков) ткани переносятся непосредственно с водных фиксаторов на воск для инфильтрации без обезвоживания или очистки.Это приводит к меньшей усадке ткани, но делать срезы труднее, чем при использовании парафина. Блоки тканей необходимо хранить в сухой атмосфере. Если нитрат целлюлозы (т.е.целлоидин / нитроцеллюлоза с низкой вязкостью) выбран в качестве среды для заливки, ткани должны быть обезвожены и залиты растворами нитрата целлюлозы, растворенными в смеси спирта и эфира. Растворителю дают испариться для получения тканевого блока необходимой консистенции. Этот метод не требует нагрева. Эта среда обычно используется для больших кусков, например, костей и тканей головного мозга.Синтетические смолы используются для изготовления срезов, как правило, для электронной микроскопии и световой микроскопии (срезы 0,5–2 мкм), например, для некальцинированной кости. Протоколы сублимационной сушки могут применяться при использовании специальных методов окрашивания [7–10, 16, 17, 21, 22, 24–28].

3. Микротомия

Микротомы используются для разрезания ткани на тонкие срезы для просмотра под микроскопом. Тип образца будет определять тип используемого микротома. Ротационные микротомы являются наиболее распространенным инструментом для микротомии.Механизм подачи достигается поворотом колеса на одной стороне машины. Пока нож зафиксирован и закреплен в держателе ножа, объект перемещается по режущей поверхности ножа в соответствии с требуемой толщиной сечения. Держатель ножа позволяет установить нож под углом к ​​образцу. Один полный оборот рабочего колеса эквивалентен одному полному циклу. Движение ножа вниз отражает ход резки, а ход вверх отражает ход возврата и активацию механизма продвижения.Механизм подачи активируется поворотом колеса, расположенного сбоку или сверху микротома. Тканевый блок проходит через нож при каждом движении, чтобы получить разрез. Микротомы имеют механизм подачи для продвижения образца (или ножа) до заданной толщины для разрезания (например, обычно 5–10 мкм) и могут производить серийные срезы [7–10, 16, 17, 21, 22, 24–28] .

3.1. Криостат

Криостат или замораживающий микротом используется для получения тонких срезов незакрепленных тканей.Его можно использовать дополнительно для наблюдения за жировыми тканями. Микротом поддерживается при температуре от –15 до –20 ° C в охлаждаемой камере. Шкаф рассчитан на работу при температуре от –5 до –30 ° C. Тканевый блок можно закрепить на платформе в водорастворимом геле с высокой вязкостью, таком как 1% глюкоза, желатин или целлюлоза, и его необходимо немедленно заморозить. Пластина стабилизатора поперечной устойчивости используется для удержания секций на лезвии ножа при прямом монтаже на суппорт. Разделы разрезаются по одному. Когда секция разрезается, пластина стабилизатора ролика поднимается, секция поднимается с поверхности ножа и помещается на слайд с помощью щетки из верблюжьей шерсти.Срезы фиксируют 5% уксусной кислотой в абсолютном спирте и затем окрашивают (например, гематоксилином и эозином). Замороженные срезы обычно используются патологом для быстрой подготовки и диагностики [7–10, 21, 22].

3.2. Ножи для микротома

Существует множество различных типов ножей для микротома (например, из нержавеющей стали, карбида, алмазов, стекла или одноразовых лезвий). Ножи из нержавеющей стали клиновидной формы используются для большинства образцов, залитых парафином. Их необходимо содержать в чистоте и хорошо смазывать или смазывать.Лезвие ножа следует очистить очищающим средством с помощью мягкой влажной ткани в вытяжном шкафу. В качестве альтернативы клиновидным ножам из нержавеющей стали одноразовые лезвия обеспечивают отличную режущую кромку для парафиновой резки и доступны в различных размерах и толщинах. Стеклянные, сапфировые и алмазные ножи используются для образцов, залитых в твердую пластмассу (например, эпоксидную смолу, гликольметакрилат). Алмазные и сапфировые ножи, как правило, работают лучше, чем стеклянные, но намного дороже.Если используется клиновидный нож из нержавеющей стали, он должен быть без зазубрин и заточен карборундовым камнем (ручная заточка) или автоматической точилкой для ножей (стеклянным кругом и абразивом). Процесс, называемый шлифовкой, позволяет получить идеально отполированную, гладкую и ровную кромку ножа. Нож фиксируется под нужным углом с помощью регулировочных винтов держателя [7–10, 16, 17, 21, 22, 24–28].

3.3. Толщина среза и черновой разрез

Толщина 6 мкм является стандартной для гистологических срезов ткани.Для высококлеточных тканей (например, лимфатических узлов) чаще всего используется 4 мкм. Для более толстых сечений используется 10 мкм. Для неврологических тканей и миелинизированных нервов используют 6–20 и 15–20 мкм соответственно. Тканевый блок будет исследован, чтобы определить, как его нужно ориентировать в держателе блока. Излишки парафина следует удалить с каждой стороны тканевого блока, чтобы придать ему форму трапеции. Более длинный край должен быть параллелен острию ножа. Тканевый блок необходимо грубо разрезать, продвигая блок вручную и делая срезы до тех пор, пока не будет обнажена вся поверхность ткани [7–10, 16, 17, 21, 22, 24–28].

3.4. Клеи для срезов, ткани для срезов и герметизация блоков

Клеи для срезов, такие как желатин, казеиновый клей, крахмал и альбумин, можно использовать для улучшения прикрепления срезов к предметному стеклу перед дальнейшей обработкой, например окрашиванием. Желатин можно добавлять в водяную баню. Использование клея в водяной бане способствует росту бактерий и грибков. Для предотвращения загрязнения необходимо ежедневно очищать водяную баню раствором гипохлорита натрия (например, мылом Clorox).В качестве альтернативы можно нанести тонкий слой альбумина непосредственно на предметное стекло, окунув его в раствор или используя пятый палец (то есть самый локтевой и самый маленький палец). Этот последний процесс называется «суббазингом». Более новая идея - использовать слайды со знаком «плюс» (+). Обработка предметного стекла реактивным кремнием или полилизиновым соединением химически изменяет стекло, так что на нем появляется большое количество аминогрупп, которые ионизируются, обеспечивая положительно заряженную поверхность. Секции, которые содержат преобладающие анионные группы, такие как карбоксилы и сложные эфиры сульфата, прочно прилипают к этому модифицированному стеклу.При создании ленты (что такое лента), т. Е. Серии смежных участков ткани, маховик следует вращать с медленной и равномерной скоростью. Слишком быстрое вращение колеса приведет к образованию участков неравной толщины. Флотационная ванна должна быть нагрета до температуры на несколько градусов ниже точки плавления парафинового воска. Можно использовать водопроводную, деионизированную или дистиллированную воду. Ленту следует постепенно опускать на флотационную ванну, чтобы устранить складки и скопившийся воздух. Пузырьки воздуха можно удалить щеткой из верблюжьей шерсти или погружением предметного стекла под ленту.Если срезы сморщиваются, перед сбором срезов в водяную баню можно добавить 70% спиртовой раствор. При необходимости секции могут быть разделены в зависимости от их размеров, и каждая может быть помещена на чистое предварительно размеченное предметное стекло. Отдельные секции или тканевые ленты можно взять, погрузив чистое предметное стекло в водяную баню под углом ~ 45 °, непосредственно под местом расположения секции или ленты. Слайд нужно поднимать из воды медленно, чтобы секции лежали на нем.Слайды следует осушить вертикально на бумажном полотенце в течение нескольких минут перед тем, как положить их на стол для подогрева (37–40 ° C). Слайды должны оставаться на столе для подогрева на ночь в течение 20–30 минут при температуре примерно 58 ° C или на несколько градусов ниже точки плавления парафинового воска. Если не слить жидкость из слайдов, под тканью образуются пузырьки воздуха, что снижает адгезию секции к слайду. Пузырьки воздуха создают неровности среза и артефакты окрашивания, что затрудняет исследование готового препарата под микроскопом.После того, как нужные секции будут вырезаны, блок можно вынуть из держателя блока и запечатать расплавленным парафином, чтобы ткань не высыхала и не становилась хрупкой (блоки могут храниться в течение недель, месяцев или лет) [7– 10, 16, 17, 21, 22, 24–28].

3.5. Проблемы, возникающие при разрезании тканевых блоков

Гистологи часто сталкиваются с трудными тканевыми блоками, которые нелегко разрезать. Это может быть результатом, например, хрупкости или сморщенности ткани, неправильной инфильтрации тканей или участков с, например, отверстиями или царапинами на них.Если тканевый блок кажется хрупким, можно нанести 10% разбавленный раствор гидроксида аммония (путем замачивания), чтобы смягчить ткань, предотвратить растрескивание и облегчить рассечение. Если в срезах есть отверстия, это может указывать на неполную инфильтрацию ткани. Это можно облегчить, поместив тканевый блок обратно в нагретую ванну с воском, чтобы расплавить его, а затем приступить к повторной заделке блока. Если на срезах ткани появляются искусственные царапины или разрывы, это может указывать на дефекты или грязь на режущей кромке ножа и может быть устранено путем изменения положения или замены лезвия.В качестве альтернативы могут возникнуть другие проблемы, если тканевый блок окажется слишком мягким или слишком твердым. Если оно слишком мягкое, можно положить блок салфетки вниз на несколько листов салфеток Kimwipes или бумажных салфеток в морозильную камеру (-15 ° C) или холодильник (0–4 ° C) (время охлаждения может варьироваться), до к секционированию. Этот метод поможет закрепить воск, чтобы он лучше соответствовал твердости инфильтрированной ткани, и приведет к более успешному разрезанию ткани. Если он слишком твердый, можно поместить кусок влажной ваты / салфетки Kimwipe в теплую воду, а затем положить на поверхность блока (время может варьироваться).Это позволит ткани расширяться / набухать и смягчаться по мере впитывания воды. Однако следует отметить, что для блоков из слишком мягкой или слишком твердой ткани эти решения являются временными и могут позволить разрезать только несколько успешных срезов [31, 32].

4. Окрашивание

Окрашивание предметных стекол осуществляется путем реверсирования процесса заливки, чтобы удалить парафиновый воск из ткани и позволить водорастворимым красителям проникнуть в срезы. Этот процесс называется «депарафинизацией».«Слайды ткани должны быть подвергнуты воздействию очищающего агента и затем перенесены через нисходящую серию спирта к воде (также называемое« переносом слайдов в воду »). Выбор подходящего красителя для конкретного предметного стекла зависит от его способности окрашивать прозрачные срезы ткани и различные клеточные компоненты ткани. Термин «стандартное окрашивание» включает окрашивание гематоксилином и эозином (т.е. H и E). Это окрашивание используется обычно, так как оно дает патологу или исследователю подробный обзор ткани, четко окрашивая, например, цитоплазму, ядро ​​и органеллы.Термин «специальные окрашивания» относится к большому количеству методов окрашивания, кроме H и E, которые позволяют визуализировать определенные тканевые структуры, элементы или микроорганизмы, которые невозможно идентифицировать с помощью окрашивания H и E [6–10, 17, 21, 22, 24–28, 31–35]. Примеры включают трихром Массона (например, кожа; идентификация коллагеновой соединительной ткани), окрашивание серебром GMS (например, легкое; идентификация Pneumocystis или Aspergillus spp.), Periodic acid-Schiff (e.g., почка; идентификация высокой доли углеводов, таких как гликоген, гликопротеины и протеогликаны), железо берлинской синей Перла (например, печень; идентификация трехвалентного (Fe 3+ ) железа в тканевых препаратах или мазках крови и костного мозга), Ziehl- Нильсена (кислотоустойчивые бациллы) (например, легкие; идентификация кислотоустойчивых бацилл), альциановый синий (например, кишечник; идентификация кислых мукополисахаридов и кислых муцинов), альциановый синий и PAS (кишечник; сочетание окрашивающих свойств обоих альцианового синего и Periodic acid-Schiff для идентификации подобных компонентов ткани), трихром Гомори (синий или зеленый) (e.g., подслизистая основа, идентификация мышечных волокон, коллагена и ядер) [36].

.

Гистология: Руководство для медицинских исследований

ПРОДОЛЖИТЬ ОБУЧЕНИЕ НАЧАТЬ СЕЙЧАС ПРОДОЛЖИТЬ ОБУЧЕНИЕ НАЧАТЬ СЕЙЧАС
  • COVID-19
    • Ресурсы по COVID-19
    • Концептуальная карта COVID-19
    • COVID-19 Осложнения
    • Видеокурс по COVID-19
    • Интерактивные досье по COVID-19
    • Студенты: советы по обучению дома
    • Студенты: профессиональные советы преподавателей по сложным темам
    • Учреждения: обеспечение непрерывности медицинского обучения
  • СТУДЕНТОВ
    • Lecturio Medical
    • Lecturio Nursing
    • Медицинский осмотр
    • USMLE Шаг 1
    • USMLE Step 2
    • COMLEX Уровень 1
    • COMLEX Уровень 2
    • MCAT
    • Больше экзаменов
      • MCCQE Часть 1
      • AMC CAT
      • ПЛАБ
    • Медицинские курсы
    • Доврачебный
    • Доклинические исследования по субъектам
    • Доклинические по системам
    • Клинические знания
  • УЧРЕЖДЕНИЙ
    • Медицинские учебные заведения
    • Непрерывность медицинского обучения
    • Переосмысление медицинского образования
    • Инициатива развития (MEDI)
  • О КОМПАНИИ
    • О нас
    • Педагоги
    • Успех обучения
    • Истории успеха
    • Обзоры
    • Пресс
  • ЦЕНА
  • COVID-19
    • Ресурсы по COVID-19
    • Концептуальная карта COVID-19
    • COVID-19 Осложнения
    • Видеокурс по COVID-19
    • Интерактивные досье по COVID-19
    • Студенты: советы по обучению дома
    • Студенты: профессиональные советы преподавателей по сложным темам
    • Учреждения: обеспечение непрерывности медицинского обучения
  • СТУДЕНТОВ
    • Lecturio Medical
    • Lecturio Nursing
    • Медицинский осмотр
    • USMLE Шаг 1
    • USMLE Step 2
    • COMLEX Уровень 1
    • COMLEX Уровень 2
    • MCAT
    • Больше экзаменов
      • MCCQE Часть 1
      • AMC CAT
      • ПЛАБ
    • Медицинские курсы
    • Доврачебный
.

гистологических образцов - английское определение, грамматика, произношение, синонимы и примеры

Раскрыты способ и устройство для окрашивания гистологических образцов , размещенных на предметных стеклах микроскопа. патенты-wipo патенты-wipo

Цветной принтер для кассет с гистологическими препаратами . патенты-wipo патенты-wipo

Проведена биопсия слюнных желез, в гистологическом препарате выявлен лимфоплазмоцитарный сиалоаденит.спрингер спрингер

Математически проанализирована проблема клеточных срезов в цитофотометрии гистологических образцов . спрингер спрингер

В особых случаях были повторно исследованы цитологические и гистологические образцы . спрингер спрингер

Автоматизированная система и метод классификации гистологических образцов патенты-wipo патенты-wipo

Точный диагноз можно установить только при исследовании гистологического препарата .спрингер спрингер

Гистологический образец кассетная система цветной печати патенты-wipo патенты-wipo

Устройство для обработки и инфильтрации гистологических препаратов патенты-wipo патенты-wipo

Кассета с гистологическим препаратом патенты-wipo патенты-wipo

Чрескожная биопсия печени и лапароскопия - важные и признанные методы получения гистологического образца печени.спрингер спрингер

Ядра клеток в цитологических образцах целы, тогда как в гистологических образцах они часто усечены. спрингер спрингер

Среднее содержание ДНК нормального, гиперпластического и злокачественного эндометрия было измерено непосредственно в гистологических образцах . спрингер спрингер

Авторы заключают, что витальное окрашивание позволяет диагностировать карциному в 97% гистологических образцов цито-.спрингер спрингер

Гистологический образец выявил диагноз аденоматоидной одонтогенной опухоли (АОТ) в кальцифицирующей одонтогенной кисте (КОК). спрингер спрингер

После лечения сложной или атипичной гиперплазии необходим контроль гистологического препарата . спрингер спрингер

Кассетный принтер для гистологических образцов включает печатающую головку и каретку, установленную относительно печатающей головки. патенты-wipo патенты-wipo

Качество окрашивания гистологических образцов влияет на гистологическую оценку образца.патенты-wipo патенты-wipo

Цитологические образцы одинаково хорошо подходят для анализа генов EGFR и FISH, как и гистологических образцов . спрингер спрингер

Эти сономорфологические паттерны коррелируют с фиброзом ворот в гистологическом образце . спрингер спрингер

гистологических образца были окрашены азаном по Массону-Голднеру. спрингер спрингер

Кроме того, ультразвуковое исследование на частоте 20 МГц и гистологический образец не выявили никаких других признаков склероза.спрингер спрингер

Картридж для гистологических препаратов слайдов включает в себя обычно закрытый корпус и держатель слайдов. патенты-wipo патенты-wipo

SL-QPM использует оригинальные немодифицированные цитологические и гистологические образцы , приготовленные по стандартным клиническим протоколам и окрашиванию. патенты-wipo патенты-wipo

Картридж для гистологических препаратов слайдов патенты-wipo патенты-wipo

.

Гистологический образец во французско-англо-французском словаре

en Раскрыты способ и устройство для окрашивания гистологических образцов, размещенных на предметных стеклах микроскопа.

патентов-wipo от Je voudrais voir des solutions plus Positives au lieu d'avoir des critical négatives qui n'apportent pas grand-selected à notre débat

en Цветной принтер для кассет гистологических образцов.

патентов-wipo от Par le maître

en Автоматизированная система и метод классификации гистологических образцов

Patents-wipo fr Compte tenu des nouveaux développements, est-il absolument nécessaire de retirer des национальные запросы, На основе предложений по изменению формул jusqu'ici par la Commission, обещает ли она альтернативные методы?

en Система цветной печати на кассете для гистологических образцов

Patents-Wipo fr Seulement... cela fait # ans que nous sommes ensemble ... et nous n 'avons pas encore fêté notre anniversaire de mariage

en Устройство для обработки и инфильтрации гистологических образцов

патент-wipo от Il fait chier à gueuler com ça

en Кассета с гистологическими образцами

патентных документов от Nous considérons que cette première année a this un véritable succès et que notre сотрудничество в рамках программы участия в капитале с большим успехом плодов.

en Авторы приходят к выводу, что витальное окрашивание позволяет диагностировать карциному в 97% цито-гистологических образцов.

springer fr Elle s 'appelle Wendy Legassic

en Кассетный принтер для гистологических образцов включает печатающую головку и каретку, установленную относительно печатающей головки.

Patents-WIPO FR Ce que j 'Attends de la vie: une Аудитория # et un audimatde

en Качество окрашивания гистологических образцов влияет на гистологическую оценку образца.

патент-wipo от est pourvue de bords souples, ces bords ne pouvant cependant être souples au point de permettre à la partie rigide de la porte d

ru Картридж для слайдов гистологических образцов включает обычно закрытый корпус и предметное стекло держатель.

патентов-wipo от tous les coûts enourus par les autorités compétentes (оценка, апробация оценок, одобрение плана, аудит и декларация соответствия) переходят на все счета для финансирования общественных организаций SL-QP в оригинальные, неизмененные цитологические и гистологические образцы, приготовленные по стандартным клиническим протоколам и окрашиванию.

патент-wipo от Affichage Nouvelle vue du haut

en Картридж для слайдов гистологических образцов

патент-wipo от Ils vous invitent à vous poser, en votre âme et Soviée, une question triès simple ou non confiance dans la Commission »?

ru SL-QPM использует оригинальные, неизмененные цитологические и гистологические образцы, приготовленные с использованием стандартных клинических протоколов и окрашивания.

патентов-wipo от L'article # se lit maintenant согласно

en Система цветной печати для слайдов и кассет гистологических образцов

патентов-wipo от Échantillonnage manuel //// Пипетка, éprouvette, autreacon ou t dispositif Susceptible de prelever des échantillons au hasard dans le lot

en Трамплин имеет держатель кассеты, сконфигурированный для приема и удерживания кассеты с гистологическим образцом.

патент-wipo от Regarde devant toi, Londubat!

en Раскрыты способ и устройство для фотографического воспроизведения больших гистологических образцов.

Patents-WIPO FR Je fuyais les British

en Гистологические образцы были получены путем сечения опухолей по наибольшему диаметру.

springer fr Saisissez une nouvelle légende &

en К сожалению, поскольку гистологические образцы не были получены, нельзя было дать оценку чувствительности и специфичности мазка Папаниколау.

Giga-fren fr Il est enfin arrivé à Saint-Domingue

en Гистологические образцы окрашивали гематоксилином, эозином и шафраном; цитологические препараты окрашивали по методикам Папаниколау и Гимза.

springer fr Lorsque la réglementation communautaire prévoit un délai pour l

en Внутренний диаметр кольца в 2-4 раза больше ширины кассет, используемых для гистологических образцов.

патент-wipo от C 'est l' enseigne d 'un Resto Big Boy

en Сенсорная иннервация слизистой оболочки глотки была исследована в соответствии с методами Бельшовского и Гросса на нескольких тысячах гистологических образцов.

springer fr Дата Расположение Presenté par EDC et:

en Из 100 гистологических образцов только 58 были патентоспособными, а во время 27 хирургических попыток реканализации только 4 оказались неудачными.

springer fr Vu l'avis n ° # / # du Conseil d'Etat donné le # février # en application de l'article #, alinéa #er, # ° des lois correonnées sur le Conseil d'Etat

ru Анализ митохондриальной ДНК оказался ценным инструментом для поддержки морфологического метода распознавания зоонозных видов Onchocerca в гистологическом образце.

pmc fr Des cookies, puis faudra que je Trouve une solution

en В способе по настоящему изобретению для консервирования макрочастиц или гистологического образца используется фиксирующая композиция, содержащая альдегидный сшивающий агент, полиол и детергент.

Patents-wipo от Dans le cas d'espèce, le Bioscope revient entièrement à l'État, fonds de commerce включают, à la fin de la concession de trente ans

en Один пациент, которого прооперировали дважды и гистологический образец которого во второй раз показал, что менингиома была злокачественной, умер через семь месяцев после второй операции.

Springer fr Ils nous disent rien ici.

Смотрите также